A gregatibcater actinomycetemcomitans adalah bal:..'teri penyebab peridontitis. Secara fannakologi disebutkan bahwa kulit buah kakao mempunyai sifat antibakteri, antifungal, antivirus, antiinflamasi, antioksidan, analgesik, dan antikanker. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efek hambat ekstrak kulit buah kakao terhadap pertwnbuhan biof11m Aggregutibcuter uctinomycetemcomitans secara m vitro. Kultur dari Aggregatibcater actinomycetemcomitans ATCC 33384 didistribusikan ke dalam 96-well-plate ketika optical density mencapai 0,25 - 0,3 (1xI07 cfu/mL). Ekstrak kulit huah kakao diencerkan dengan BHl hingga terbentuk konsentrasi 100%, 50%, 25%, 12,5% clan 6,25% dan ditambahkan ke dalam well-plate. Efek hambat diobservasi setelah 15 menit, 1 jam, 3 jam, dan 6 jam. Ekstraksi dari kristal violet (0,5% w/v) yang masih berada dalam well dihitung sebagai jumlah biofilm dengan menggunakan ELISA reader pada panjang gelombang 490 nm dengan menambahkan etanol 90% sebanyak 200 µL. Terdapat penurunan optical density dari biofilm setelab diberikan ekstrak kulit bu.ah kakao, Konsentras.i terbaik d.alam menghambat biofilm Aggregatibcater actinomycetemcomitans adalah ekstrak kulit buah kakao 100% dengan masa inkubasi 3 jam. Hasil uji ANOVA satu jalan dan Tukey HSD menunjukkan adanya perbedaan yang signifikan (p < 0,05) pada beberapa konsentrasi dan masa inkubasi. Penelitian ini menunjukkan bahwa ekstrak kulit buah kakao memiliki efek hambat terhadap pertumbuhan biofilm Aggregatibcater actinomycetemcomitans yang berguna dalam pencegahan penyakit periodontal.