K ulit nanas merupakan limbah buah nanas yang memiliki kandungan flavonoid, dan tanin. Salah satu masalah kesehatan mulut yang sering ditemukan adalah periodontitis. Periodontitis adalah infeksi kronis yang menyebabkan kerusakan jaringan pendukung gigi, termasuk ligamen periodontal dan tulang alveolar. Salah satu penyebab periodontitis adalah bakteri Aggregatibacter actinomycetemcomitans. Tujuan penelitian ini adalah mengetahui apakah ekstrak kulit nanas (Ananas comosus) memiliki efek antibakteri terhadap pertumbuhan Aggregatibacter actinomycetemcomitans. Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental laboratorium yang dilakukan secara in vitro dengan metode difusi agar menggunakan cawan petri. Ekstrak kulit nanas didapat dengan metode maserasi dengan pelarut etanol 96%. Bakteri Aggregatibacter actinomycetemcomitans diambil dari biakan murni Laboratorium MiCORE Fakultas Kedokteran Gigi Universitas Trisakti. Hasil penelitian ini menujukkan ekstrak kulit nanas memiliki daya hambat terhadap pertumbuhan bakteri Aggregatibacter actinomycetemcomitans. Zona hambat ekstrak kulit nanas konsentrasi 100% sebesar 16,16 mm, konsentrasi 50% sebesar 11,15, konsentrasi 25% sebesar 9,92 mm, konsentrasi 12,5% sebesar 7,92 mm, dan klorheksidin sebesar 21,85 mm. Berdasarkan penelitian ini dapat disimpulkan bahwa ekstrak kulit nanas memiliki daya hambat terhadap Aggregatibacter actinomycetemcomitans, tetapi masih kurang besar dibandingkan dengan klorheksidin.