K anker merupakan salah satu penyakit yang dapat menyebabkan kematian. Kanker lidah adalah keganasan yang paling umum didiagnosis dalam rongga mulut, yang menyumbang antara 25% dan 40% karsinoma sel skuamosa oral. Terapi kanker rongga mulut meliputi tidakan pembedahan, radioterapi, dan kemoterapi. Asam valproat merupakan obat antikonvulsan secara khusus berkerja sebagai penghambat histone deacetylase atau aktivator persinyalan dalam menekan pertumbuhan tumor. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh asam valproat terhadap viabilitas, sitotoksisitas, proliferasi dan migrasi sel HSC-3. Penelitian ini menggunakan metode eksperimental laboratorium in vitro menggunakan asam valproat pada subjek penelitian sel HSC-3 dengan kelompok perlakuan dibagi menjadi empat, kelompok pertama adalah kontrol negatif terdiri dari medium kultur tanpa asam valproat, kelompok kedua, ketiga dan keempat berturut-turut diberikan asam valproat dengan konsentrasi 145ppm, 180ppm dan 355ppm. Hasil penelitian menunjukan perbedaan yang signifikan (p<0.05) antara sel HSC-3 yang diberikan asam valproat dengan konsentrasi 145ppm, 180ppm dan 355ppm dibandingkan dengan kontrol pada uji viabilitas, sitotoksisitas, dan proliferasi sel HSC-3. Terjadi penurunan viabilitas sel, peningkatan sitotoksisitas, dan penurunan proliferasi. Pada hasil uji migrasi menunjukkan adanya pengaruh asam valproat terhadap percepatan migrasi sel HSC-3. Kesimpulan pada penelitian ini yaitu, asam valproat dapat menurunkan viabilitas dan proliferasi, peningkatan sitotoksisitas, serta dapat menghambat percepatan migrasi sel HSC-3.