L atar belakang: Karsinoma sel skuamosa (KSS) merupakan bentuk yang paling umum dari kanker rongga mulut. Perawatan KSS umumnya menggunakan prosedur pembedahan, kemoterapi, radioterapi, terapi kombinasi, dan prosedur terbaru menggunakan obat antikanker selektif. Saat ini terdapat lebih dari 60% senyawa antikanker yang diperoleh dari bahan alam, salah satunya adalah Gnetum gnemon L. (G. gnemon L.) atau biasa disebut melinjo. Tujuan: Untuk mengetahui apakah ekstrak etanol biji G. gnemon L. dengan konsentrasi 1, 10, dan 100 g/mL dapat menurunkan viabilitas dan menginduksi apoptosis sel lini HSC-3. Metode: Penelitian eksperimental laboratoris (in vitro) dilakukan menggunakan sel lini HSC-3. Sel diberi perlakuan ekstrak etanol biji G. gnemon L. dengan konsentrasi 1, 10, dan 100 g/mL selama 24 jam. Etanol 70% digunakan sebagai pelarut dan kontrol negatif. Doksorubisin digunakan sebagai kontrol positif. Sel yang telah diberi perlakuan dianalisis menggunakan uji MTT dan flow cytometry untuk memeriksa perubahan viabilitas sel dan apoptosis yang terjadi. Hasil: Ekstrak etanol biji G. gnemon L. dengan konsentrasi 1, 10, dan 100 g/mL dapat menurunkan viabilitas dan menginduksi apoptosis pada sel lini HSC-3 secara signifikan (p<0,05). Kemampuan menurunkan viabilitas meningkat seiring bertambahnya konsentrasi ekstrak yaitu sebanyak 8.169 sel, 5.789 sel, dan 3.068 sel serta menginduksi apoptosis sebesar 8,33 ± 0,93%, 16,55 ± 1,51%, dan 28,73 ± 0,89% dari sel yang diuji secara berurutan. Kesimpulan: Pemberian ekstrak etanol biji G. gnemon L. dengan konsentrasi 1, 10, dan 100 g/mL selama 24 jam mampu menurunkan viabilitas dan menginduksi apoptosis pada sel lini HSC-3