K itosan merupakan amina polisakarida yang dapat ditemukan pada kumbang tanduk Xylotrupes gideon yaitu serangga yang dapat merusak tanaman pucuk pohon kelapa, dengan kandungan kitosan sebesar 48,32% lebih tinggi dibandingkan dengan kitosan pada udang. Modifikasi fisik kitosan menjadi nanopartikel dapat meningkatkan aktifitas kitosan menjadi lebih baik. Suatu bahan material alam yang dapat digunakan dalam bidang kedokteran gigi adalah dapat diterima oleh sel tubuh salah satunya fibroblas. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh nano kitosan pada deraj at deasetilasi dan konsentrasi berbeda terhadap viabilitas fibroblas. Pengujian pengaruh nano kitosan terhadap viabilitas fibroblas terbagi menjadi empat kelompok yaitu, nano kitosan konsentrasi 5%, 10%, 15%, dan kelompok kontrol. Viabilitas fibroblas diukur menggunakan microplate reader pada panjang gelombang 450nm. Hasil penelitian memperlihatkan pemberian nano kitosan derajat deasetilasi 85% pada konsentrasi 5%, 10%, dan 15% mampu mempengaruhi viabilitas, dengan meningkatkan densitas fibroblas sebesar 5.67%, 26.67%, dan 37.93% sedangkan nano kitosan derajat deasetilasi 93% dapat meningkatkan densitas fibroblas sebesar 41.13%, 28.56%, 18.13% dibandingkan dengan tanpa pemberian nano kitosan. Hasil penelitian memperlihatkan nano kitosan mampu mempengaruhi viabilitas sel ditunjukkan dengan meningkatknya densitas fibroblas, dengan nilai densitas tertinggi pada nano kitosan derajat deasetilasi 85% pada konsentrasi 15% sedangkan nano kitosan derajat deasetilasi 93% pada konsentrasi 5%.