K itosan adalah polisakarida hasil dari deasetilasi kitin yang dapat ditemukan pada kumbang tanduk Xylotrupes gideon, dengan kandungan 48.32% lebih tinggi dibandingkan kitosan pada udang yang merupakan kitosan komersial dengan kandungan sebesar 26,2%. Untuk meningkatkan kualitas kitosan maka dilakukan modifikasi baik secara kimia dengan meningkatkan derajat deasetilasi (DD) dan secara fisik dengan memperkecil ukuran menjadi nano partikel. Peningkatan kualitas kitosan dapat diaplikasikan pada banyak bidang seperti kedokteran gigi, dengan tidak bersifat toksik, tidak mengiritasi dan harus mempunyai sifat biokompatibilitas pada sel-sel dalam tubuh seperti fibroblas. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh paparan nano kitosan pada DD dan konsentrasi berbeda terhadap sitotoksisitas fibroblas. Pengujian dilakukan menggunakan nano kitosan DD 85% dan 93%, yang terbagi dalam empat kelompok konsentrasi yaitu 5%, 10%, 15%, dan kelompok tanpa paparan nano kitosan. Hasil penelitian paparan nano kitosan DD 85% dan 93% tidak memperlihatkan perbedaan bermakna dengan tanpa paparan nano kitosan terhadap kematian fibroblas (p>0.05), namun hasil rerata menunjukkan terjadinya penurunan kematian fibroblas akibat paparan nano kitosan DD 85% pada konsentrasi 10% dan 15% dibandingkan dengan tanpa paparan nano kitosan. Sedangkan, hasil rerata paparan nano kitosan DD 93% menurunkan tingkat kematian fibroblas pada semua konsentrasi dibandingkan tanpa paparan nano kitosan. Hasil penelitian memperlihatkan paparan nano kitosan pada DD dan konsentrasi berbeda mampu menurunkan tingkat kematian sel meskipun tidak menunjukkan perbedaan yang bermakna secara statistik.