L atar Belakang: Musa paradisiaca Linn adalah tanaman pisang yang memiliki banyak manfaat pada daun, batang, buah, jantung, dan kulitnya . Senyawa yang terdapat dalam kulit pisang masih perlu diteliti untuk pengobatan berbagai penyakit. Kanker mulut adalah penyakit yang sering terjadi pada saat ini, pengobatan kanker mengandung bahan kimia sintetik dan proses pembedahan yang memiliki resiko yang tinggi. Pada pengobatan kanker, salah satu bahan alam yang digunakan adalah kulit M. paradisiaca, diketahui ekstrak kulit M. paradisiaca memiliki kemampuan sitotoksisitas terhadap sel lini hsc-3. Tujuan: Mengetahui efek ekstrak kulit M. paradisiaca pada fraksi etanol, etil asetat, dan heksana terhadap sitotoksisitas sel lini HSC-3. Metode: Sel lini HSC-3 diberikan perlakuan dengan ekstrak fraksi etanol, etil asetat, dan heksana kulit M. paradisiaca dengan konsentrasi masing-masing 50 𝜇g/mL, 100 𝜇g/mL, 200 𝜇g/mL, 400 𝜇g/mL selama 24 jam, lalu di uji dengan CCK-8 assay untuk menghitung persentase sitotoksisitas sel dan mendapatkan nilai IC50. Hasil: Hasil uji fitokimia dari ekstrak kulit pisang memiliki kandungan flavonoid, alkaloid, tanin, saponin, terpenoid, kuinon, dan steroid. Dari tiga fraksi yang digunakan ekstrak fraksi heksana memiliki sitotoksisitas yang paling tinggi pada konsentrasi 400 𝜇g/mL karena memiliki kandungan steroid dan terpenoid. Sedangkan, pada pengukuran derajat sitotoksisitas sel lini HSC-3 ekstrak fraksi heksana memiliki Optical Density dengan nilai IC50 sebesar 409,2 𝜇g/mL. Analisis statistik menggunakan ANOVA satu arah dan Tukey’s HSD dianggap signifikan p<0,001. Kesimpulan: Ekstrak fraksi heksana konsentrasi 400 𝜇g/mL kulit M. paradisiaca memiliki potensi untuk dibuat sebagai bahan terapi antikanker HSC-3.