K egiatan eksplorasi minyak bumi di Indonesia selain memberikan sumbangsih yang besar bagi pertumbuhan ekonomi juga berpotensi menyebabkan peningkatan resiko pencemaran dan perusakan lingkungan akibat dari tumpahan minyak (oil spillage) di tanah maupun perairan. Minyak bumi yang tercecer dianggap sebagai sumber pencemar dan dapat dihasilkan dari semua aktivitas perminyakan mulai dari eksplorasi sampai ke proses pengilangan. Penelitian ini bermaksud untuk mengatasi pencemaran minyak bumi di lingkungan dengan pendekatan bioteknologi melalui proses remediasi dengan tujuan untuk: 1) menentukan respon pertumbuhan bakteri Pseudomonas aeruginosa dan Brevibacterium sp. di dalam media SMSs (Stone Mineral Salt Solution) yang tercemar minyak bumi; 2) menentukan kondisi lingkungan optimum yang memberikan efisiensi paling tinggi dalam penyisihan TPH (Total Petroleum Hydrocarbon). Kultivasi dilakukan dalam erlemeyer, dengan volume bahan penelitian sebesar 80% dari kapasitas total. Komposisi yang digunakan yaitu media SMSs 80% (v/v), pupuk cair NPK 5% (v/v), bakteri kultur campuran 10% (v/v). Inkubasi dilakukan dalam shaker incubator pada suhu 25oC. Uji degradasi minyak bumi dilakukan dalam skala laboratorium dengan kondisi lingkungan yang terkontrol dalam sistem terbatas (batch culture).Variasi yang dilakukan pada uji degradasi di media cair SMSs yaitu nilai keasaman (pH) 5, 7, 9; waktu kontak (hari) 7, 14, 21, 28; dan konsentrasi minyak bumi (%(v/v) 5, 10, 15, 20. Penyisihan TPH dianalisis dengan metode gravimetri. Hasil uji sensitivitas menunjukkan campuran bakteri Pseudomonas aeruginosa dan Brevibacterium sp. bersifat resisten atau tidak peka terhadap minyak bumi. Hal ini dibuktikan dengan tidak terbentuknya zona hambat di sekitar kertas cakram yang mengandung minyak bumi. Hasil penyisihan TPH oleh bakteri kultur campuran dalam media SMSs terjadi paling optimum pada kondisi pH 7, konsentrasi minyak bumi sebesar 5% (v/v), dan waktu kontak selama 21 hari. Efisiensi penyisihan yang diperoleh yaitu 97,3% dengan kosentrasi awal TPH sebesar 81,23% (w/w) dan kosentrasi TPH akhir sebesar 2,19% (w/w). Hasil uji optimasi konsentrasi minyak bumi (v/v) menunjukkan hasil bahwa penambahan konsentrasi minyak bumi (v/v) tidak menyebabkan penyisihan TPH menjadi semakin besar. Meskipun begitu, efisiensi penyisihan yang dihasilkan oleh bakteri Pseudomonas aeruginosa dan Brevibacterium sp. masih terbilang tinggi dengan keseluruhan nilai efisiensi untuk semua perlakuan di atas 67,6%.