L Latar belakang: Prevalensi karies gigi dan rerata indeks DMFT di Indonesia padatahun 2018 berada pada tingkat keparahan karies gigi yang sangat tinggi. Salah satu penyebab karies adalah Streptococcus mutans yang dapat berkolonisasi membentuk biofilm gigi dan mengubah lingkungan rongga mulut menjadi asam sehingga terjadi karies. Obat kumur klorheksidin dianggap sebagai baku emas untuk mengendalikan plak gigi, namun memiliki berbagai efek samping sehingga diperlukan bahan alam sebagai bahan antibakteri alternatif. Lycium barbarum L. mengandung berbagai senyawa metabolit sekunder seperti flavonoid dan asam fenolik yang diharapkan dapat menghambat pertumbuhan S. mutans. Tujuan: Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efek antibakteri dan antibiofilm ekstrak etanol buah gojiberi (Lycium barbarum L.) terhadap S. mutans. Metode: Eksperimental laboratoris secara in vitro dengan rancangan post test group design with control group. Ekstrak buah L. barbarum L. diperoleh dengan metode maserasi menggunakan pelarut etanol 96%. Larutan uji yang digunakan adalah ekstrak etanol buah L. barbarum L. dengan konsentrasi 100%, 50%, 25%, 12,5%, 6,25%, dan 3,125%, klorheksidin glukonat 0,2% sebagai kontrol positif, dan aquades steril sebagai kontrol negatif. Uji antibakteri dilakukan dengan metode mikrodilusi dan plate count. Uji antibiofilm dilakukan dengan metode microtiter plate assay. Hasil: Pada uji antibakteri dengan metode mikrodilusi menunjukkan efek antibakteri mulai dari konsentrasi terkecil, yaitu 3,125%. Pada uji antibakteri dengan metode plate count menunjukkan efek antibakteri mulai dari konsentrasi 6,25%. Pada uji antibiofilm, konsentrasi 100% pada masa inkubasi 1 jam dan 24 jam serta konsentrasi 100%, 50%, dan 25% pada masa inkubasi 3 jam memiliki daya hambat biofilm yang lebih baik dibandingkan klorheksidin glukonat 0,2%. Kesimpulan: Ekstrak etanol buah L. barbarum L. terbukti memiliki efek antibakteri dan antibiofilm terhadap S. mutans.