L imbah kulit buah biasanya dibuang begitu saja dan tidak dimanfaatkan oleh masyarakat. Salah satu limbah kulit buah yang banyak dihasilkan adalah limbah kulit pisang kepok. Limbah kulit pisang kepok jika tidak dimanfaatkan akan menjadi sampah dan permasalahan lingkungan. Permasalahan limbah kulit pisang kepok ini dapat diatasi dengan melakukan usaha pemanfaatan lebih lanjut, yaitu mengubahnya menjadi bioethanol. Penelitian ini bertujuan untuk mengolah limbah kulit pisang kepok menjadi bioethanol dengan memanfaatkan fungi Aspergillus fumigatus dan ragi Saccharomyces cerevisiae. Fungi Aspergillus fumigatus dan ragi Saccharomyces cerevisiae dikultivasi pada media Potato Dextrose Broth (PDB) dan Yeast Extract Glucose Peptone (YEGP). Penelitian diawali dengan melakukan preparasi limbah kulit pisang secara mekanis hingga menjadi bubuk kulit pisang (substrat). Tahap delignifikasi atau tahap pretreatment dilakukan dengan variasi perbandingan substrat: biokatalisator= 1:1, 1:5, dan 1:10 pada waktu kontak 24, 72, dan 120 jam. Kadar lignin diukur dengan menggunakan metode gravimetri. Tahap selanjutnya yaitu tahap hidrolisis dilakukan dengan menggunakan variasi perbandingan substrat: biokatalisator= 1:1, 1:5, dan 1:10 pada waktu kontak 24, 72, dan 120 jam. Konsentrasi glukosa diukur dengan menggunakan metode 3,5-dinitrosalisilat (DNS). Tahap fermentasi dilakukan dengan menggunakan variasi perbandingan substrat: biokatalisator 1:1, 1:2 dan 2:1 pada waktu kontak 72, 120 dan 420 jam. Tahap destilasi adalah tahap setelah fermentasi. Tahap destilasi dilakukan agar kandungan ethanol yang dihasilkan dapat diukur dengan menggunakan alat Gas Chromatography Mass Stretoscopy (GC-MS). Pada tahap pretreatment diperoleh penyisihan kadar lignin tertinggi sebesar 60%. Hasil konsentrasi gula tertinggi pada tahap hidrolisis sebesar 1,175 g/L pada variasi substrat: biokatalisator= 1: 10 pada waktu kontak 120 jam. Kandungan ethanol tertinggi sebesar 12,64% pada perbandingan 1:2 pada waktu kontak 120 jam. Hal ini menunjukkan bahwa pemanfaatan limbah kulit pisang kepok yang mengandung lignoselulosa dapat dimanfaatkan sebagai sumber bioetanol melalui yang bertujuan mengurangi limbah organik.