L Latar Belakang: Karies merupakan salah satu penyakit yang paling umumdijumpai di Indonesia, RISKESDAS membuktikan prevalensi orang Indonesiayang mengalami karies sebesar 88,8%. Mikroorganisme yang terlibat dalamperkembangan karies dari pulpitis hingga menyebar ke saluran akar antara lainEnterococcus faecalis dan Candida albicans. Keduanya dapat hidup padalingkungan ekstrim. Probiotik seperti Lactobacillus reuteri memproduksi reuterinyang dikenal sebagai agen antimikrobial. Tujuan: Untuk meneliti efektivitasreuterin dalam menghambat pertumbuhan dan mengeradikasi biofilm E. faecalisdan C. albicans in vitro dan ex vivo pada saluran akar gigi. Metode: L. reuteridikultur pada MRS broth, diinkubasi anaerob selama 24 jam pada suhu 20oC. E.faecalis ATCC 29212 dikultur pada Brain Heart Infusion broth 37oC selama 24 jamanaerob, dan C. albicans pada Saboraud Dextrose broth 37oC selama 48 jamanaerob. Penelitian ini menggunakan metode MIC, biofilm assay preventif 24 jam,terapeutik 1, 6, dan 24 jam, perhitungan koloni, dan qPCR untuk memeriksapenurunan jumlah biofilm E. faecalis dan C. albicans. Hasil: Hasil penelitianmenunjukkan perbedaan signifikan dari pertumbuhan dan eradikasi perlekatanbiofilm pada konsentrasi reuterin yang cukup tinggi. Secara statistik, hasil ujiANOVA satu jalan membuktikan perbedaan signifikan (p<0,05). Kesimpulan:Berdasarkan hasil, dapat disimpulkan bahwa reuterin dapat menghambat danmengeradikasi perlekatan biofilm E. faecalis dan C. albicans baik secara in vitromaupun ex vivo. Hasil penelitian ini juga menunjukkan bahwa reuterin berpotensidigunakan sebagai bahan irigasi alternatif untuk perawatan saluran akar.