C Citrus aurantifolia merupakan tumbuhan obat yang daunnya dapat digunakan sebagai pengobatan terhadap beberapa penyakit. Daun C. aurantifolia mengandung sejumlah senyawa organik seperti minyak atsiri, alkaloid, flavonoid, saponin dan tanin yang pada beberapa tumbuhan lain telah diketahui memiliki aktivitas antibakteri. Penelitian ini meliputi penelitian eksplorasi dan eksperimental laboratoris dengan rancangan the post test only design. Penelitian ini menggunakan metode dilusi tabling dan dilanjutkan ke penelitian kedua dengan metode cawan gores. Penelitian pertama untuk mengetahui keberadaan daya hambat ekstrak daun C. aurantifolia terhadap S. mutans sedangkan penelitian kedua untuk mengetahui hubungan antara konsentrasi ekstrak terhadap pertumbuhan S. mutans. Penelitian kedua dilengkapi dengan melakukan metode cawan gores sebagai konfirmasi dari hasil dilusi tabung K1 (100%), K2 (50%), K3 (25%), K6 (Kontrol negatif), dan K7 (Kontrol positif). Analisis data menggunakan uji normalitas, uji one way Anova dan uji Tukey. Hasil analisis data menunjukkan bahwa C. aurantifolia memiliki aktifitas bakteri terhadap S. mutans. Nilai MIC (Kadar Hambat Minimum) berada pada rentang konsentrasi >25%- <50% dan nilai MBC (Kadar Bunuh Minimum) berada pada konsentrasi 50%.