A Alpinia galanga atau lengkuas merupakan salah satu tanaman obat berkhasiat di Indonesia yang memiliki berbagai fungsi pengobatan baik dalam pengobatan tradisional maupun pengobatan modern seperti anti-malaria, anti-kanker, juga untuk mengobati jamur di kulit dan banyak penyakit lainnya. Selain itu, lengkuas memiliki sifat anti-mikrobial yang berfungsi sebagai bakterisida, fungisida, dan germisida. Lengkuas berpotensi untuk dikembangkan menjadi obat herbal terstandar, sebagai tahap awal perlu dilakukan uji sitotoksisitas. Tujuan penelitian untuk mengetahui apakah rimpang Alpinia galanga (L.) Willd mempunyai efek toksik terhadap fibroblas. Metode penelitiannya ekstraksi lengkuas dengan maserasi menggunakan pelarut etanol 96%. uji sitotoksisitas menggunakan pewarnaan MTT dan spektrofotometer dengan λ 560 nm. Hasil menunjukkan pada konsentrasi tertinggi (50%) jumlah sel yang bertahan hidup lebih banyak dibandingkan pada konsentrasi lainnya yang lebih rendah (3,125%, 6,25%, 12,5%, 25%). Demikian pula, viabilitas fibroblast pada pemberian ekstrak etanol 96% rimpang Alpinia galanga (L.) Willd pada setiap konsentrasi lebih tinggi dibanding dengan kontrol+ (H2O2) baik pada pengamatan 24 jam maupun 48 jam. Pada setiap konsentrasi ekstrak lengkuas yang diberikan, jumlah viabilitas sel bertambah pada pengamatan 48 jam kecuali pada konsentrasi 25%. Nilai IC50 pada pengamatan 24 jam dan 48 jam adalah 78.0979% dan 82.2946%. Uji statistik Anova 1 jalan pada pengamatan 24 jam menunjukkan perbedaan bermakna (p=0,00<0,05). Namun uji rentang ganda Duncan menunjukkan tidak ada perbedaan bermakna antar konsentrasi. Uji statistik Kruskal Wallis pada pengamatan 48 jam menunjukkan ada perbedaan bermakna jumlah viabilitas sel antar konsentrasi. Kesimpulan, ada efek toksik dari pelbagai konsentrasi ekstrak etanol 96% rimpang Alpinia galanga (L.) Willd mulai konsentrasi 3,125% sampai 50%.