L Latar Belakang: Adanya kerusakan jaringan, menyebabkan netrofil dan makrofag selama fase inflamasi akan memproduksi Reactive Oxygen Species (ROS) secara berlebih sebagai antimikroba. Produksi ROS yang berlebihan menyebabkan kerusakan oksidatif progresif yang dapat memperlambat penyembuhan, yang berakhir pada kematian sel. Daun serai dapur (Cymbopogon citratus) dengan senyawa aktif antioksidan yang dienkapsulasi dengan polimer kitosan dan dimodifikasi secara fisik menjadi nanopartikel diketahui dapat meningkatkan stabilitas dan efektifitas senyawa aktif daun C. citratus dalam penyembuhan luka. Tujuan: Menurunkan produksi ROS fibroblas yang mengalami stress oksidatif dengan pemberian enkapsulasi nano kitosan ekstrak etanol daun serai dapur (NKEDSD). Metode: Penelitian terbagi menjadi sepuluh kelompok, yaitu tanpa perlakuan (kontrol negatif), asam askorbat (kontrol positif), kelompok stessor hidrogen peroksida (H2O2), kitosan, ekstrak daun C. citratus sebagai kontrol pembanding, serta lima kelompok perlakuan NKEDSD dengan konsentrasi 100 ppm, 50 ppm, 25 ppm, 12,5 ppm, dan 6,5 ppm. Seluruh kelompok perlakuan kemudian diberikan pewarnaan Dichlorodihydrofluorescein diacetate (H2DCFDA) dan diikuti pewarnaan 4’,6-diamidino-2-phenylindole (DAPI), setelah itu diamati dibawah mikroskop fluoresens dan dihitung jumlah sel terfluoresensi hijaunya dengan software Image J. Hasil: Pada kelompok NKEDSD memperlihatkan semakin tinggi konsentrasi yang diberikan semakin rendah produksi ROS yang dihasilkan fibroblas (p<0,05), dengan konsentrasi terbaik yaitu 100 ppm. Asam askorbat memiliki kemampuan terbaik dalam menurunkan produksi ROS, sedangkan kelompok stressor memproduksi ROS tertinggi. Kesimpulan: Semakin tinggi konsentrasi NKEDSD, semakin efektif dalam menurunkan produksi ROS fibroblas, dengan konsentrasi NKEDSD terbaik pada 100 ppm.