L Latar Belakang : Penyakit periodontal merupakan salah satu penyakit mulut dengan prevalensi yang tinggi didunia. Staphylococcus aureus dan Streptococcus sanguinis merupakan salah satu bakteri early colonizer yang dominan dalam menyebabkan penyakit periodontal. Salah satu tanaman yang memiliki kandungan antibakteri adalah daun kemangi (Ocimum sanctum). Daun kemangi diketahui memiliki beberapa senyawa aktif seperti flavonoid, fenolik, alkaloid dan triterpenoid yang dapat menghambat pertumbuhan bakteri. Tujuan : untuk mengetahui efektivitas daya hambat ekstrak daun kemangi (Ocimum sanctum) terhadap pertumbuhan Staphylococcus aureus dan Streptococcus sanguinis. Metode : Penelitian ini merupakan eksperimental laboratorium. Bahan uji penelitian ini yaitu ekstrak daun kemangi dengan konsentrasi 100%, 50%, 25%, 12,5%, dan 6,25%, klorheksidin 0,2% sebagai kontrol positif, dan aquades sebagai kontrol negatif. Sampel yang digunakan yaitu biakan Staphylococcus aureus dan Streptococcus sanguinis. Data dianalisis dengan uji Shapiro-Wilk, data yang didapat terdistribusi dengan normal dan dilanjutkan dengan uji OneWay ANOVA, lalu dengan Post-Hoc. Hasil : Terdapat diameter zona hambat terhadap bakteri Staphylococcus aureus dan Streptococcus sanguinis pada 3 konsentrasi ekstrak daun kemangi; 100%, 50%, 25%. Dengan rata-rata diameter zona hambat pada 100% yaitu 17.4 mm, 50% sebesar 11.8 mm, 25% sebesar 11.4 mm. 3 konsentrasi tersebut memiliki perbedaan bermakna dengan kontrol negatif. Kesimpulan : Ekstrak daun kemangi (Ocimum sanctum) dapat menghambat pertumbuhan Staphylococcus aureus dan Streptococcus sanguinis dalam konsentrasi tertentu.