L Latar belakang : Gigi adalah salah satu faktor estetik yang cukup penting, salah satu yang mempengaruhi adalah wama gigi. Berbagai cara untuk mendapatkan wama gigi yang ideal, salah satunya dengan cara perawatan menggunakan bahan pemutih. Karbamid peroksida adalah bahan yang diindikasikan untuk pemutihan gigi ekstemal. Namun penggunaan bahan tersebut dapat menimbulkan efek samping bagi penderita yang sensitif terhadap bahan tersebut dan besamya biaya yang hams dikeluarkan untuk melakukan perawatan ini. Kitosan dan kalsium memiliki sifat yang menguntungkan seperti biocompatible, biodegradable, dan tidak beracun. Kitosan banyak digunakan sebagai bahan dalam berbagai jenis produk kosmetik dan juga menjadi salah satu bahan tambahan pemutih pada kulit. Maka dari itu dibuat alternatif lain yaitu pembuatan pemutih gigi berbahan dasar nanopartikel kitosan dan kalsium dari kumbang tanduk. Tujuan : Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh penggunaan nanopartikel kitosan dan kalsium terhadap perubahan wama gigi. Metode : Penelitian yang dilakukan adalah eksperimental laboratoris in vitro dengan metode Pre-test Post-test design. Sampel yang digunakan adalah 50 gigi premolar atas pasca ekstraksi yang dibagi dalam 5 kelompok dan direndam dalam 5 formulasi yang berbeda. Pengukuran wama awal dilakukan dengan alat VITA Easyshade V. Perendaman gigi dilakukan selama 14 hari, setelah itu wama gigi diukur kembali. Hasil : Uji statistik dengan uji T sampel berpasangan menunjukkan terdapat perbedaan signifikan dalam penggunaan formulasi nanopartikel kitosan yang ditambahkan dengan karbamid peroksida 16% terhadap perubahan wama gigi (P<0.05). Kesimpulan : Formulasi nanopartikel kitosan yang ditambahkan dengan karbamid peroksida 16% dapat meningkatkan wama gigi menjadi lebih cerah.