L Latar belakang: Penyakit periodontal merupakan salah satu penyakit gigi dan mulut yang memiliki prevalensi yang tinggi di Indonesia. Penyakit periodontal dapat disebabkan oleh bakteri pada plak subgingiva, seperti Porphyromonas gingivalis dan Fusobacterium nucleatum. Obat herbal memiliki potensi sebagai alternatif dalam perawatan penyakit periodontal, salah satunya adalah daun rambutan (Nephelium lappaceum L.) yang diketahui memiliki sifat antibakteri karena mengandung flavonoid, tanin, dan saponin. Tujuan: Untuk mengetahui efek ekstrak daun rambutan (Nephelium lappaceum L.) terhadap pertumbuhan bakteri serta perlekatan biofilm Porphyromonas gingivalis dan Fusobacterium nucleatum. Metode penelitian: Uji aktivitas antibakteri dilakukan dengan metode mikrodilusi dan pengukuran densitas biofilm dengan metode biofilm assay. Hasil: Konsentrasi ekstrak daun rambutan yang paling efektif menghambat pertumbuhan bakteri adalah konsentrasi 100% dengan rata-rata jumlah koloni sebesar 16 x 106 CFU/mL pada Porphyromonas gingivalis dan sebesar 38 x 106 CFU/mL pada Fusobacterium nucleatum. Selain itu, konsentrasi ekstrak daun rambutan yang paling efektif menghambat perlekatan biofilm adalah konsentrasi 100% pada inkubasi 6 jam dengan rata-rata optical density (OD) 0,108 terhadap Porphyromonas gingivalis dan konsentrasi 100% pada inkubasi 24 jam dengan rata-rata OD 0,077 terhadap Fusobacterium nucleatum. Kesimpulan: Ekstrak daun rambutan (Nephelium lappaceum L.) memiliki efek antibakteri serta dapat menghambat perlekatan biofilm Porphyromonas gingivalis dan Fusobacterium nucleatum.