I Industri berbasis pertanian menghasilkan sejumlah besar limbah padat seperti kulit ketela. Penelitian ini bertujuan untuk memanfaatkan limbah kulit ketela sebagai biomassa (substrat) yang berpotensi menjadi bioethanol. Proses pembuatan bioetanol dilalui dengan 4 tahap yaitu pretreatment/delignifikasi, hidrolisis, fermentasi, dan destilasi. Kulit ketela dipreparasi secara mekanis hingga berukuran 40-80 mesh sebanyak 10 gr. Biokatalisator Aspergillus fumigatus dan Saccharomyces cerevisae dikultivasi pada media Potato Dextrose Broth (PDB) dan Yeast Malt Extract Glucose Peptone (YMGP). Delignifikasi oleh A. fumigatus divariasikan dengan perbandingan substrat:biokatalisator = 1:1; 2:1; dan 1:2 pada waktu kontak 3, 5, dan 7 hari. Kadar lignin pada tahap delignifikasi diukur menggunakan metode gravimetri. Hidrolisis dilakukan untuk menghasilkan glukosa sebagai substrat yang dapat di fermentasi oleh S. cerevisae. Hidrolisis dilakukan dengan asam sulfat (H2SO4) 1, 3, dan 5% pada waktu kontak 30, 60 dan 90 menit. Konsentrasi glukosa diukur dengan menggunakan metode 3,5-dinitrosalisilat (DNS). Fermentasi dilakukan oleh S. cerevisae menggunakan variasi substrat:biokatalisator = 1:1; 2:1; dan 1:2 pada waktu kontak 3, 5 dan 7 hari. Proses destilasi dilakukan setelah fermentasi pada suhu 70oC yang diukur dengan menggunakan metode Gas Chromatography – Mass Spectophotometry (GCMS). Penelitian ini menghasilkan delignifikasi optimum terjadi pada variasi perbandingan 2:1 pada waktu kontak 5 hari dengan penyisihan lignin sebesar 40,64%. Konsentrasi glukosa optimum pada tahap hidrolisis menghasilkan 1,817 g/L pada konsentrasi asam sulfat (H2SO4) 5% pada waktu kontak 60 menit. Kandungan etanol tertinggi terjadi pada perbandingan 1:2 dengan waktu kontak 5 hari. Terdapat kandungan lainnya dalam pengukuran etanol yaitu Phenyl Alcohol. Kandungan etanol sebesar 73,77% didapatkan dari etanol dan Phenyl Alcohol. Berdasarkan perhitungan pilot scale dengan diameter 17 m dan tinggi 17 m, maka untuk 100 kg kulit ketela dapat menghasilkan 185,87 L etanol total. Diperlukan kajian lebih lanjut pada penelitian ini untuk meningkatkan produksi etanol dari bahan baku kulit ketela. Penelitian ini memberikan informasi bahwa kulit ketela dapat menghasilkan bioetanol melalui proses enzimatis yang melibatkan fungi A. fumigatus dan S. cerevisae.