L Latar belakang: Luka merupakan hal yang sering ditemui pada kehidupan sehari hari. Pada proses penyembuhan luka di fase inflamasi, kadar reactive oxygenspecies (ROS) akan meningkat, peningkatan ROS yang tidak terkontrol dapatmenyebabkan sel mengalami stres oksidatif yang dapat menghambat prosespenyembuhan luka. Serai dapur merupakan tanaman yang digunakan sebagai obattradisional namun penggunaannya hanya sebatas batangnya, sehingga daunnyaseringkali menjadi limbah. Kandungan senyawa aktif ekstrak daun serai dapurdiketahui memiliki efek antioksidan yang tinggi dan mampu menurunkan produksiROS dan mempercepat penyembuhan luka. Tujuan: Untuk mengetahui aktivitasantioksidan ekstrak daun serai dapur dalam menurunkan produksi ROS sertapengaruhnya terhadap viabilitas, sitotoksisitas, dan proliferasi fibroblas yangmengalami stres oksidatif. Metode: Penelitian dibagi menjadi 8 kelompok yaitufibroblas tanpa perlakuan (kontrol negatif), fibroblas yang diinduksi H2O2, fibroblasyang diberikan asam askorbat (kontrol positif), serta ekstrak daun serai dapur padakonsentrasi 10, 20, 30, 40, dan 50 ppm. Pengujian antioksidan dilakukan denganmetode DPPH, pengujian ROS dilakukan dengan pewarnaan fluoresensH2DCFDA, sedangkan viabilitas serta proliferasi dilakukan menggunakan CCK-8pada panjang gelombang 450 nm. Hasil: aktivitas antioksidan ekstrak daun seraidapur dengan nilai IC50 64,17 ppm memiliki nilai sitotoksisitas IC50 99,96 ppm dandapat menurunkan produksi ROS, meningkatkan viabilitas dan proliferasi dengankonsentrasi terbaik pada 10 ppm dibandingkan dengan kelompok ekstrak daun seraidapur lainnya dan kelompok kontrol. Kesimpulan: Ekstrak daun serai dapurmemiliki aktivitas antioksidan yang kuat yang mampu menurukan stres oksidatifsehingga mampu meningkatkan viabilitas dan daya proliferasi fibroblas, dengankonsentrasi ekstrak daun serai dapur terbaik pada konsentrasi 10 ppm.