S Streptococcus sanguinis dan Treponema denticola merupakan bakteri yang dapat menyebabkan terjadinya penyakit periodontal. Berdasarkan laporan World Health Organization (WHO) pada tahun 2012, ditemukan sekitar 15-20% pada kasus orang dewasa yang mengalami penyakit periodontal. Tanaman sarang semut (Myrmecodia pendans) mengandung triterpenoid, flavonoid, saponin dan tokoferol yang berperan sebagai antibakteri. Penelitian ini bertujuan untuk menganalisis efek ekstrak Myrmecodia pendans terhadap pembentukan biofilm Streptococcus sanguinis dan Treponema denticola monospesies dan multispesies. Penelitian yang dilakukan adalah eksperimental laboratoris menggunakan metode biofilm assay dengan ekstrak etanol Myrmecodia pendans konsentrasi 100%, 50%, 25%, 12,5% dan 6,25%, kontrol positif (klorheksidin 0,2%) dan kontrol negatif (BHI-B). Ekstrak M. pendans didistribusikan ke dalam96 well-plate yang sebelumnya berisi bakteri Streptococcus sanguinis dan Treponema denticola monospesies dan multispesies, kemudian diinkubasikan dalam 4 masa inkubasi yaitu 1 jam, 3 jam, 6 jam dan 24 jam pada suasana anaerob. Hasil uji berupa Optical Density (OD) dibaca dengan microplate reader dengan panjang gelombang 490 nm. Pada uji normalitas menunjukkan data terdistribusi nornal (p>0,05) dan dilanjutkan dengan uji one way ANOVA dan uji Post Hoc LSD yang menunjukkan adanya perbedaan signifikan (p<0,05). Terlihat ekstrak dengan konsentrasi terbaik dalam menurunkan pembentukan biofilm adalah 100%. Penelitian ini menunjukkan bahwa ekstrak Myrmecodia pendans memiliki efek hambat terhadap biofilm Streptococcus sanguinis dan Treponema denticola sehingga dapat dijadikan obat yang dapat menghambat bakteri Streptococcus sanguinis dan Treponema denticola.