L Latar belakang Staphylococcus aureus adalah bakteri gram positif yang dapat menyebabkan berbagai penyakit pada manusia. Oleh sebab itu air perasan lemon dan nanas yang memiliki potensi sebagai zat antibakteri diharapkan dapat menghambat pertumbuhan bakteri S.aureus. Metode Penelitian merupakan penelitian eksperimental sesungguhnya dengan desain kelompok kontrol hanya postes. Sampel menggunakan bakteri Staphylococcus aureus, air perasan lemon dan air perasan nanas. Pengujian sifat antibakteri menggunakan metode difusi dengan teknik sumuran. Zona hambat yang timbul kemudian akan diukur dengan jangka sorong. Analisis data dengan menggunakan SPSS for Windows versi 16.0 dan tingkat kemaknaan yang digunakan sebesar 0,5. Hasil KHM kualitatif dari air perasan lemon dan nanas telah mampu menghambat pertumbuhan bakteri S.aureus pada konsentrasi 12,5%. Dari hasil uji regresi linear, kedua air perasan telah menghambat pertumbuhan bakteri S.aureus secara bermakna. Selanjutnya dari uji Kruskal-Wallis, keempat konsentrasi (100%, 50%, 25%, dan 12,5%) dari kedua air perasan menunjukkan perbedaan yang bermakna terhadap pertumbuhan bakteri S.aureus. Kemudian dilakukan uji lanjutan dengan uji Mann-Whitney menunjukkan bahwa kedua air perasan dengan berbagai konsentrasinya tidak memiliki perbedaan dengan kontrol positif antibiotik sefaleksin. Kesimpulan Penelitian ini menunjukkan bahwa air perasan lemon dan nanas mampu menghambat pertumbuhan bakteri S.aureus pada semua variasi konsentrasi air perasan. Dan air perasan lemon secara kuantitatif dan kualitatif lebih baik dalam menghambat pertumbuhan bakteri S.aureus dibandingkan dengan air perasan nanas.