L Latar Belakang: Kanker nasofaring (KNF) merupakan salah satu kanker yang paling banyak terjadi di Indonesia dengan urutan ke-4. Apoptosis jalur intrinsik dapat mengeliminasi sel yang berbahaya dan tidak diperlukan tubuh dengan selektif. Mitochondrial outer membrane permeabilization (MOMP) dapat diinduksi untuk meningkatkan mitochondrial membrane permeability sehingga protein proapoptotik dapat keluar ke sitosol dan mengaktifkan proses apoptosis. Curcuma xanthorrhiza dilaporkan memiliki efek antikanker dan terbukti dapat menginduksi apoptosis pada berbagai sel kanker. Tujuan: Untuk mengetahui apakah ekstrak C. xanthorrhiza konsentrasi 10, 50, dan 250 g/mL mampu menginduksi mitochondrial membrane permeability pada cell line HONE-1 dengan waktu paparan 6 jam. Metode: Penelitian eksperimental laboratoris (in vitro) dilakukan menggunakan cell line HONE-1. Sel diberi perlakuan ekstrak C. xanthorrhiza 10, 50, dan 250 g/mL selama 6 jam. Dimetil sulfoksida (DMSO) digunakan sebagai pelarut dan kontrol negatif. Doxorubicin HCl dan H2O2 digunakan sebagai kontrol positif. Sel yang telah diberi perlakuan dianalisis menggunakan flow cytometer (FC) dengan zat warna DiOC6 untuk memeriksa perubahan mitochondrial membrane permeability. Hasil: Ekstrak C. xanthorrhiza 10, 50, dan 250 g/mL mampu menginduksi mitochondrial membrane permeability pada cell line HONE-1 secara signifikan (p<0,05). Kemampuan menginduksinya meningkat seiring bertambahnya konsentrasi ekstrak yang diberikan, yaitu sebanyak 40,67%, 59,33%, dan 84,83% secara berurutan. Kesimpulan: Pemberian ekstrak C. xanthorrhiza 10, 50, dan 250 g/mL selama 6 jam mampu menginduksi mitochondrial membrane permeability pada cell line HONE-1. Kemampuan ekstrak C. xanthorrhiza menginduksi mitochondrial membrane permeability berbeda tergantung dari konsentrasi yang diberikan.