L Latar belakang: Odontologi forensik adalah cabang kedokteran gigi yang selain bermanfaat dalam bidang kesehatan, juga bermanfaat dalam bidang penegakan hukum. Salah satunya adalah dalam melakukan identifikasi pada seorang individu melalui gigi geligi. Odontologi forensik dapat melakukan identifikasi dengan menganalisis jejas gigit (bitemark). Metode yang kerap digunakan dalam melakukan analisis bitemark antara lain adalah metode overlay. Metode overlay ini dapat dilakukan secara manual ataupun menggunakan bantuan alat dan teknologi yang lebih modern seperti perangkat komputer atau yang disebut sebagai metode overlay berbasis komputer. Tujuan: Untuk mengetahui apakah terdapat perbedaan hasil interpretasi antara metode overlay manual dengan metode overlay berbasis komputer dalam menganalisis bitemark. Metode: Penelitian observasional analitik dengan subjek sebanyak 90 subjek (45 sampel rahang atas dan 45 sampel rahang bawah). Subjek membuat bitemark pada apel dengan cara menggigit apel. Dilakukan pencetakan pada gigi geligi subjek kemudian dibuatkan model studinya, lalu dilakukan tracing pola gigi geligi subjek secara manual pada kertas mika transparan dan melalui perangkat komputer pada aplikasi Adobe photoshop. Dilakukan perbandingan antara hasil tracing gigi geligi subjek dengan bukti bitemark dengan metode overlay manual dan komputer kemudian dilakukan skoring. Analisis data menggunakan uji Mann Whitney. Hasil: Hasil penelitian mendapatkan bahwa terdapat perbedaan yang signifikan (p < 0.05) pada hasil interpretasi analisis bitemark saat menggunakan metode overlay manual dan overlay berbasis komputer pada rahang atas dan rahang bawah. Kesimpulan: Penelitian ini menunjukkan bahwa terdapat perbedaan yang signifikan pada hasil interpretasi antara metode overlay manual dengan metode overlay berbasis komputer dalam menganalisis bitemark.