L Latar Belakang: Nano Alfa-Trikalsium Fosfat (alfa-TCP) dianggap sebagai inovasi material yang memenuhi persyaratan sebagai bahan perawatan pulp capping karena memiliki kemampuan untuk membentuk dentin reparatif. Bahan perawatan pulp capping berkontak langsung dengan pulpa, sehingga salah satu syarat untuk material ini adalah biokompatibel. Untuk mengevaluasi bahan di kedokteran gigi dapat dilakukan uji sitotoksisitas untuk mengetahui efek toksik suatu bahan terhadap sel dan dapat diterima oleh jaringan. Sehingga perlu dilakukan uji sitotoksisitas pada nano alfa-TCP untuk mengtahui apakah bahan toksik atau tidak. Tujuan: Penelitian ini untuk mengetahui sitotoksisitas nano alfa-TCP pada fibroblas. Metode: Penelitian dilakukan dengan uji sitotoksisitas menggunakan reagen CCK-8 Assay dengan kelompok perlakuan nano alfa-TCP konsentrasi 100 µg/mL, 50 µg/mL, dan 25 µg/mL, MTA sebagai kontrol positif dan kontrol negatif yaitu tanpa perlakuan. Hasil uji dibaca dengan spektrofotometer untuk melihat jumlah sel selama 24 dan 72 jam setelah perlakuan. Hasil: Pada uji sitotoksisitas nano alfa-TCP jumlah sel pada konsentrasi 100 µg/mL,50 µg/mL, dan 25 µg/mL lebih tinggi jika dibandingkan dengan kelompok kontrol negatif sebagai kelompok pembanding dengan jumlah sel terendah Kesimpulan: Dari hasil penelitian dapat disimpulkan bahwa nano alfa-TCP tidak toksik terhadap fibroblas.