L Latar belakang: Pada praktek sehari-hari, pasien sering kali menanyakan obatkumur apa yang sebaiknya dipakai sehari-hari atau untuk mengatasi keluhan dalammulutnya. Diketahui saat ini ada banyak sekali obat kumur yang dijual bebas dipasaran, salah satunya obat kumur minyak esensial, klorheksidin, povidone iodinedan chlorine dioxide. Tujuan: Untuk mengetahui perbedaan aktivitas beberapaobat kumur terstandar (minyak esensial, klorheksidin, povidone iodine dan chlorinedioxide) terhadap biofilm multistrain Streptococcus mutans, Porphyromonasgingivalis dan Fusobacterium nucleatum. Metode: Penelitian eksperimentallaboratoris ini dilakukan dengan menggunakan metode biofilm assay secara in vitrodi Microbiology Center of Research and Education (MiCORE) FakultasKedokteran Gigi Universitas Trisakti. Hasil: Setelah dilakukan uji ANOVA satuarah, keempat obat tersebut tidak memiliki perbedaan yang signifikan pada hasilnya(p > 0.05). Pada uji preventif dengan masa inkubasi 24 jam, obat kumur yang palingbaik dalam menekan jumlah biofilm multistrain adalah obat kumur povidone iodine(OD 0,020 ± 0,014). Pada uji terapeutik dengan masa inkubasi 30 menit, obat kumuryang paling baik adalah chlorine dioxide (OD 0,046 ± 0,017). Sedangkan pada ujiterapeutik dengan masa inkubasi 3 jam dan 6 jam, obat kumur yang paling baikadalah klorheksidin (OD 0,051 ± 0,025 dan 0,045 ± 0,017). Kesimpulan:Penelitian ini menunjukkan bahwa keempat obat tersebut memiliki hasil yang samabagusnya, namun terdapat perbedaan kekuatan obat dalam eradikasi biofilmberdasarkan waktunya.