D Dental pulp stem cells (DPSCs) dapat digunakan untuk terapi regeneratif endodontik. Namun untuk memperoleh DPSCs, sel pulpa gigi harus diisolasi terlebih dahulu dari jaringan pulpa gigi. Tujuan penelitian ini untuk mengetahui efektifitas dari isolasi sel pulpa dengan kombinasi teknik outgrowth dan enzim disagregasi, serta mengobservasi perubahan morfologi dari hasil kultur. Sel pulpa berasal dari gigi molar ketiga permanen manusia yang diisolasi dengan kombinasi teknik outgrowth dan enzim disagregasi. Sel dikultur dan disubkultur dalam media tumbuh komplit yang terdiri dari: Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium (DMEM) dengan fetal bovine serum 20% dan antibiotik-antimikotik, selanjutnya diinkubasi pada suhu 37oC dengan atmosfer 5% CO2. Observasi dilakukan terhadap perubahan morfologi dari hasil kultur dan subkultur sel pulpa gigi. Hasil dari penelitian ini menunjukkan bahwa pada hari ke-3 kultur sel pulpa gigi mulai menunjukkan hasil isolasi sel berupa fibroblast-like cells. Pada akhir kultur (hari ke-17) dan pasase ke-10 dari subkultur sel pulpa gigi, diperoleh hasil morfologi yang sama, yaitu: fibroblast-like cells dengan bentuk spindel dan kontur yang memanjang dengan perluasan sitoplamik. Teknik isolasi yang digunakan dalam penelitian ini ternyata efektif dalam mengisolasi sel pulpa gigi yang menghasilkan fibroblast-like cells serta dapat dipertahankan morfologinya sampai pada pasase ke-10.