L Low Density Polyethylene (LDPE) adalah salah satu jenis plastik sebagai sumber utama pencemaran yang terakumulasi di lingkungan. Akumulasi tersebut terutama disebabkan oleh sulitnya jenis plastik LDPE terdegradasi secara alami karena tahan air, fleksibel dan memiliki rantai panjang. Penelitian ini bertujuan untuk mendegradasi plastik LDPE menggunakan variasi temperatur, pH dan waktu kontak dengan pendekatan bioteknologi lingkungan oleh campuran bakteri Thiobacillus sp. dan Clostridium sp. Kultur campuran bakteri ditumbuhkan dalam media pertumbuhan Stone Mineral Salt Solution (SMSs) menggunakan sistem batch. Dalam penelitian ini, metode yang digunakan adalah Gravimetri untuk mengetahui persentase kehilangan berat LDPE, Fourier Transform Infrared Spectroscopy (FTIR) untuk menentukan perubahan intensitas gugus etilen dan Scanning Electron Microscopy (SEM) untuk melihat perubahan morfologi pada permukaan LDPE. Untuk memperoleh kondisi optimum yang menghasilkan degradasi paling tinggi, telah dilakukan penelitian secara simultan dengan variasi temperatur (oC) 25, 30, 35 ; pH 5, 7, 9 dan waktu kontak 10, 30, 60 dan 90 hari maka untuk setiap perlakuan ditambahkan 10% (v/v) dan 50% (v/v) kultur campuran bakteri. Penyisihan LDPE tertinggi terjadi pada temperatur 25oC dengan nilai keasaman (pH) 5 pada waktu 30 hari oleh komposisi kultur campuran bakteri50% (v/v). Dengan metode gravimetri, kultur campuran bakteri Thiobacillus sp. dan Clostridium sp. berpotensi untuk mendegradasi plastik LDPE dengan penyisihan sebesar 6,70% dalam waktu 30 hari. Dengan FTIR, penurunan intensitas tertinggi adalah sebesar 65,25% dan dengan SEM terjadi perubahan morfologi pada permukaan plastik yang semula halus menjadi kasar dan berpori. Hal tersebut menunjukkan bahwa Thiobacillus sp. dan Clostridium sp. berpotensi mendegradasi LDPE secara biologi karena dapat memanfaatkannya sebagai sumber karbon.